LISA标准曲线 Excel 直接套用模板(夹心法/竞争法通用)
一、数据表结构(直接照着建表)
序号 标准品浓度X (ng/mL、pg/mL) OD1 OD2 平均OD Y 扣空白后Y值 备注
S0 0(空白) —— 空白对照
S1 低浓度1 标准点1
S2 低浓度2 标准点2
S3 中浓度1 标准点3
S4 中浓度2 标准点4
S5 高浓度1 标准点5
S6 高浓度2 标准点6
二、全部单元格公式(直接复制粘贴)
假设:
- C列=OD1,D列=OD2
- S0空白行:第2行
1. 平均OD(E列)
E2输入:
excel
=(C2+D2)/2
下拉填充整列
2. 扣空白后Y值(F列,核心)
F2(空白行留空),F3输入:
excel
=E3-$E$2
下拉填充所有标准品行
三、标准曲线作图步骤(Excel 完整版)
1. 选中区域:X浓度列 + F列扣空白后Y值
2. 插入 → 散点图 → 无数据点平滑散点图
3. 右键曲线上数据点 → 添加趋势线- 常规ELISA【夹心法】:
趋势线选项 → 选择 非线性→四参数Logistic(4PL)
- 竞争法ELISA:
选用 Logit-log 拟合 或 4PL
4. 勾选:显示公式、显示R平方值
判定:R2 ≥ 0.99 曲线合格
四、待测样本浓度计算公式
单独新建样本计算区
样本编号 稀释倍数 样本平均OD 扣空白OD 计算原浓度
已知4PL方程:
\boldsymbol{Y = d+\dfrac{a-d}{1+(X/c)^b}}
需要反推浓度X,Excel反算通用逻辑:
拿到曲线公式后,把「扣空白OD」代入Y,求解X即为测得浓度,再乘以稀释倍数。
极简操作
如果你把你的一组标准浓度+OD值发给我,我可以:
1. 直接帮你算出4PL方程
2. 给你现成的计算单元格公式,粘贴即可自动出所有样本浓度
五、实操关键提醒
1. 标准品最少6个梯度点+空白,每点2复孔
2. 显色、终止、读板统一时间,避免曲线漂移
3. 复孔CV>10%直接剔除异常值重算
4. 样本OD超出标准曲线范围,必须稀释复测
