一、血样前处理（血清 / 血浆）
1. 血清（无抗凝剂）
- 采血：干燥促凝管（红/黄盖）
- 凝固：室温静置 20–30 min（或 4℃过夜）
- 离心：4℃、1000–3000×g / 2500–3500 rpm，10–20 min
- 取上清：淡黄色透明上清（避溶血、避血块）
- 保存：分装 → -20℃ / -80℃，避免反复冻融
2. 血浆（含抗凝剂）
- 采血：EDTA（紫）/ 肝素（绿）/ 枸橼酸钠（黑）管
- 混匀：采血后立即轻柔颠倒 8–10 次
- 离心：4℃、1000–3000×g，10–15 min
- 取上清：上层清亮血浆（避白细胞层）
- 保存：同血清
血样关键注意
- 严禁溶血（血红蛋白干扰酶标，假阳性）
- 高血脂样本慎用
- 保存出现沉淀：再次离心后使用
二、组织样本前处理（匀浆上清）
1. 清洗：预冷 PBS（0.01M, pH7.4） 冲净血迹/杂质
2. 剪碎称重：剪至1mm3碎块，精确称重
3. 匀浆比例：1g 组织 + 9mL 预冷 PBS/裂解液（1:9）- 加蛋白酶抑制剂（PMSF等）
- 全程冰浴操作
4. 匀浆：玻璃/电动匀浆器 → 无肉眼可见组织块
5. 离心：4℃、5000–10000×g，5–15 min
6. 取上清：中层清亮上清（弃沉淀/脂肪层）
7. 保存：分装 → -20℃ / -80℃
三、通用要点（必看）
- 全程低温：冰浴/4℃，防蛋白降解
- 分装保存：避免反复冻融（≤2次）
- 离心清晰：取上清不碰沉淀/中间层
- 对照试剂盒：确认抗凝剂兼容性、样本稀释要求
