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夹心法和竞争法两种方法ELISA技术的比较

发表时间:2025-11-07

    在酶联吸附测定实验中,主要类型有直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和夹心ELISA。比较常用的是夹心ELISA和竞争ELISA。上海科澄维针对这两种类型重点为您介绍下区别。

  Elisa夹心法

  Elisa夹心法是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体(捕获抗体),然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体(检测抗体),与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体—抗原—固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量。整个过程中,待检抗原经过捕获抗体和检测抗体双重筛选,具有高特异性。

  Elisa夹心法的优点是特异性高、灵敏度高,但其主要缺点是捕获抗体和检测抗体之间存在相互作用。

Elisa竞争法

  ELISA竞争法预先将抗原包被在固相载体上,并加入酶标记的特异性抗体,实验时,加入待检抗原(或抗体),如果待检物是抗原,则待检抗原于预先包被在固相载体上的抗原竞争结合酶标抗体,如果待检测物是抗体,则待检抗体就与系统中原有的酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原,通过洗涤洗掉被竞争结合的酶标抗体,最后加底物显色,需要注意的是显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比。

  Elisa竞争法的优点是适合检测小抗原,适合检测复杂样品,特异性高,灵敏度高。但是,它有一些缺点,例如每次ELISA都需要标记抗体,这可能导致抗体失活,随着靶抗原的增加信号会降低。

  Elisa实验选择夹心法还是竞争法?

  1.根据待测物质的大小:若待测物质为大分子抗原,如蛋白质、多糖等,建议选择夹心法;若待测物质为小分子抗原或抗体,则竞争法可能更为合适。
  2.根据实验需求:若需要高灵敏度的检测,夹心法通常是更好的选择;若需要进行定量或半定量检测,竞争法则可能更适合。
  3.考虑实验操作的复杂性:夹心法相对复杂,需要两种特异性抗体;而竞争法则相对简单,但可能需要在实验设计和数据分析上投入更多精力。
  上述:科澄维生物为科研工作者介绍这两种ELISA类型的区别,作为实验室较为常用的酶联技术,它们有各自特点。具体使用方法结合实验需求及检测物质大小来确定。如果您还有关于这两种类型ELISA其它问题,欢迎咨询科澄维工作人员。

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